Helios / Hyperion

¿Cómo reacciona el sistema inmune ante un agente infeccioso, un tumor, un alérgeno…? La extraordinaria complejidad de tipos celulares e interacciones, en ocasiones con la presencia de poblaciones tan minoritarias como importantes, solo puede resolverse con técnicas de muy alto nivel de multiplexado.

La citometría convencional tiene dos limitaciones. La primera es el número de marcadores simultáneos a ensayar, y la segunda, es la necesidad de trabajar con suspensiones unicelulares, por lo que pierde la información espacial de los diferentes fenotipos presentes en un tejido.

La citometría de flujo acoplada a espectrometría de Masas  CyTOF, supera las limitaciones de la citometría convencional, basada en fluorescencia, con los problemas de solapamiento de los espectros de emisión, y por tanto la limitación en el diseño de paneles, y en el número de marcadores simultáneos a analizar. El efecto practico es la dificultad de interpretar muestras muy complejas de células, caracterizadas por la expresión de múltiples biomarcadores.

En lugar de separar señales en función de diferencias de longitud de onda, las separa según diferencias de masa. Emplea anticuerpos conjugados a metales, con una resolución de 1 dalton, y un detector de 135 canales. Esto supone un marcaje mucho más uniforme, sin diferencias de intensidad de señal entre marcadores, sin señal de fondo, y sin el requerimiento de controles para cada canal, aportando muchísima más información por célula.

Al poder combinar todos los parámetros en un único tubo, el requerimiento de células es mucho menor, facilitando el análisis de muestras de valor clínico.

Para abordar el segundo problema de la citometría clásica, Fluidigm acopla un sistema de imagen para citometría de masas (Helios), llevando el análisis de imagen de secciones de tejidos a nivel multi-paramétrico sin precedentes en ninguna tecnología existente, con capacidad de más de 50 parámetros, y una resolución de 1 micra. Esto supone una auténtica revolución en el análisis de imagen, hasta la fecha imposible.